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液相色譜柱在選購時(shí)需注意哪些問題?
點(diǎn)擊次數(shù):2011 發(fā)布時(shí)間:2020-10-27
液相色譜柱在選購時(shí)需注意哪些問題?
在選擇色譜柱之前,多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、性、酸堿性、分子量大小等等。
1.樣品是性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對(duì)性化合物保留好的色譜柱
2. 如果樣品性太,或酸性太;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+陰離子對(duì)試劑或陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長,對(duì)流動(dòng)相pH要求比較,否 則難重復(fù)實(shí)驗(yàn),另外離子對(duì)試劑難洗下來,基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))
3.如果堿性化合物的性太,或堿性太;可以選擇寬pH的C18色譜柱在pH值檢測(點(diǎn)是方法開發(fā)簡單,缺點(diǎn)是目前實(shí) 現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價(jià)格也)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇離子交換柱(缺點(diǎn) 是不能用來分析其它樣品,對(duì)流動(dòng)相pH要求比較,否則難重復(fù)實(shí)驗(yàn))也有使用C18+陰離子對(duì)試劑或陰離子交換色譜柱
4. 若樣品是堿性的;可選擇純硅膠柱(純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾,一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留。