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凝膠色譜系統(tǒng)是一種用于純化生物分子的高效技術(shù)
點(diǎn)擊次數(shù):664 發(fā)布時(shí)間:2023-04-22
凝膠色譜系統(tǒng)是一種用于純化生物分子的高效技術(shù)。這種技術(shù)主要是通過(guò)分離材料的孔徑大小來(lái)分離生物分子的不同分子量的物質(zhì)的一種方法。
凝膠色譜系統(tǒng)可以用于從復(fù)雜的混合物中純化出一種目標(biāo)分子。凝膠色譜系統(tǒng)的基本原理是利用凝膠(通常為聚丙烯酰胺或瓊脂糖等)來(lái)填充色譜柱。凝膠中有不同大小的孔,孔徑大小與凝膠的性質(zhì)有關(guān)。目標(biāo)分子在凝膠中移動(dòng)時(shí),會(huì)受到孔徑大小的限制而被分離出來(lái)。如果目標(biāo)分子的分子量較小,則會(huì)沿著凝膠孔徑大的方向運(yùn)動(dòng),如果目標(biāo)分子的分子量較大,則會(huì)向孔徑小的方向移動(dòng)。
凝膠色譜系統(tǒng)主要有兩種類型:尺寸排阻色譜(SEC)和離子交換色譜(IEC)。尺寸排阻色譜利用成對(duì)交聯(lián)的高分子凝膠來(lái)排除分子尺寸相對(duì)較大的物質(zhì),相對(duì)較小的物質(zhì)則會(huì)被保留在凝膠中。離子交換色譜則是通過(guò)與凝膠表面上負(fù)電荷離子相互作用來(lái)分離帶電分子。在離子交換色譜中,分子可以在凝膠中進(jìn)行分離,具體分離取決于酸堿性質(zhì)。凝膠色譜系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)是可以從復(fù)雜的混合物中快速、高效地分離出目標(biāo)分子,且不會(huì)對(duì)目標(biāo)分子產(chǎn)生嚴(yán)重的損傷。
凝膠色譜系統(tǒng)還可以與其他技術(shù)(如聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、電泳)結(jié)合使用,以實(shí)現(xiàn)更高靈敏度和精確度。最后,需要指出的是,凝膠色譜系統(tǒng)還有一些局限性,如分離效果受到分子的極性和電性質(zhì)、分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)的影響。
由于凝膠色譜系統(tǒng)在分離過(guò)程中需要涉及對(duì)比色譜柱的各種參數(shù)(如孔徑大小、表面電性等),因此對(duì)于非專業(yè)人士使用較為困難,需要一定的專業(yè)知識(shí)和技能才能正確操作。